بروموفینول نیلاہلکے پیلے سے بھورے پیلے رنگ کا پاؤڈر ہے۔ یہ سوڈیم ہائیڈرو آکسائیڈ محلول میں آسانی سے حل ہوتا ہے، میتھانول، ایتھنول اور بینزین میں حل ہوتا ہے، پانی میں قدرے حل ہوتا ہے (تقریباً {{0}.4g/100ml)، اور زیادہ سے زیادہ جذب طول موج 422nm ہے۔ یہ ایک پی ایچ اشارے ہے۔ pH 3.0~4.6 کی حد میں، رنگ پیلے سے نیلے میں بدل جاتا ہے۔ یہ عام طور پر الیکٹروفورٹک اشارے کے رنگ کے طور پر بھی استعمال ہوتا ہے۔ جیل میں الیکٹروفورٹک منتقلی کی شرح نیوکلک ایسڈ یا پروٹین کے چھوٹے مالیکیولز کے علاقے میں ہے۔ جب انسانی ہیموگلوبن اور مختلف جانوروں کے ہیموگلوبن کے درمیان تعامل کا مطالعہ کیا گیا تو اتفاقی طور پر پتہ چلا کہ بروموفینول بلیو (بی پی بی) کراس الیکٹروفورسس کے عمل میں چکن ہیموگلوبن کے ساتھ بھی تعامل کرسکتا ہے، لیکن یہ رجحان بی پی بی اور بالغوں کے درمیان موجود نہیں ہے۔ ہیموگلوبن بی پی بی ہیموگلوبن سے مختلف ہے۔ یہ ایک کم سالماتی مرکب ہے۔ ہیموگلوبن کے ساتھ اس کا تعامل میکانزم میں ہیموگلوبن کے درمیان تعامل سے مختلف ہوسکتا ہے۔
بروموفینول بلیو کے استعمال کی مثالیں درج ذیل ہیں:
1. ہائیڈروجن آئن کی شناخت کے لیے فوٹو کیمیکل کمپوزٹ حساس جھلی تیار کی گئی۔ طریقہ کار کے مراحل درج ذیل ہیں:
1) سب سے پہلے، 55 گرام ایکریلامائڈ کو 20-30 ملی لیٹر ڈسٹل پانی میں گھولیں، اسے فلٹر کریں، پھر فلٹر شدہ مائع کو کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا کریں، پھر سکشن فلٹریشن کریں، اس کے کرسٹلائز ہونے اور قدرتی طور پر خشک ہونے کا انتظار کریں، خالص ایکریلامائڈ حاصل کرنے کے لیے اسے ویکیوم خشک کریں۔ ;
2) 10گرام خالص ایکریلامائڈ، 0 کو تحلیل کریں۔{3}}۔{8}}5 گرام امونیم پرسلفیٹ، 0۔{6}}.25 گرام این، این میتھیلین ایکریلامائڈ، 001-0.012 گرام کریسول وایلیٹ اور 002-0.022 گرام بروموفینول نیلے پانی میں، نائٹروجن کے ساتھ ڈی آکسائڈائز کریں اور H پلس آئنوفور حساس پولیمر پر مبنی حاصل کرنے کے لیے انہیں آہستہ آہستہ گرم کریں۔ کریسول وایلیٹ اور بروموفینول بلیو پر؛
3) ایک تیز رفتار سینٹری فیوج پولیمر کو گھما کر فوٹو کیمیکل کمپوزٹ حساس فلم بنانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ اس ایجاد میں سادہ عمل، کم لاگت اور اچھی رسپانس اسپیڈ، درجہ حرارت کی خصوصیات اور تیار کردہ حساس فلم کی ریپیٹبلٹی ہے۔ یہ مؤثر طریقے سے حساس رینج کو ہائیڈروجن آئنوں تک بڑھا سکتا ہے، اور ہائیڈروجن آئن فوٹو کیمیکل سینسر کو پہچاننے والے کے حساس حصے کی تیاری کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
2. کیلشیم سپلیمنٹ فنکشن کے ساتھ ایک مرکب پروٹین پاؤڈر تیار کیا جاتا ہے، جس میں درج ذیل خام مال اور وزن کے حصے ہوتے ہیں: بادام کا کیک کل ماس کا 30-40 فیصد ہوتا ہے۔ ایسیٹون کل ماس کا 1.5 ~ 2.5 فیصد ہے۔ سوڈیم بائی کاربونیٹ محلول کا کل ماس میں تناسب 8-15 فیصد ہے ; ہائیڈروکلورک ایسڈ کل ماس کا 1.5~2.5 فیصد ہے۔ بروموفینول نیلے رنگ کا مجموعی ماس کا 1.5 ~ 2.5 فیصد ہے۔ کل ماس میں وٹامن ڈی کا تناسب 12-18 فیصد تھا ; کیلشیم گلوکوونیٹ کل ماس کا 15-20 فیصد ہے۔ ایتھنول کل ماس کا 1.5~2.5 فیصد ہے اور ڈسٹل واٹر کل ماس کا 15~20 فیصد ہے۔ اس ایجاد میں بادام کیک کو خام مال کے طور پر استعمال کیا گیا ہے، ایسیٹون اور ایتھنول کے ساتھ نچوڑ، پروٹین پاؤڈر تیار کرنے کے لیے فلٹر اور خشک کیا گیا ہے، اور کیلشیم گلوکوونیٹ کو کیلشیم سپلیمنٹ کے طور پر استعمال کیا گیا ہے۔ اس طریقے کے استعمال سے تیار کردہ کمپاؤنڈ پروٹین پاؤڈر نہ صرف حسی معیار کو واضح طور پر بہتر بناتا ہے، بلکہ پروٹین اور کیلشیم گلوکوونیٹ کے ساتھ استعمال ہونے پر استعمال کے اثر کو بھی بہت بہتر بنا سکتا ہے، جو کیلشیم کی کمی والے درمیانی عمر اور بزرگ افراد کے لیے موزوں ہے۔
3. سلفونی لوریاس کی افادیت کا اندازہ لگانے کے لیے ایک کٹ تیار کریں، جس میں درج ذیل اجزاء ہوں:
(1) سرخ خون کے خلیے لیسیٹ؛
(2) Leukocyte lysate؛
(3) پروٹین ترسیب حل؛
(4) نیوکلک ایسڈ اسٹوریج حل؛
(5) پی سی آر ری ایکشن مکسچر (جس میں ایم جی سی ایل 2، ڈی این ٹی پی، پی سی آر ایمپلیفیکیشن پرائمر اور اندرونی معیار شامل ہیں)؛
(6) ڈی این اے پولیمریز؛
(7) مثبت کوالٹی کنٹرول؛
(8) منفی کنٹرول؛
(9) Endonuclease بفر سسٹم؛
(10) پابندی endonuclease؛
(11) پی سی آر پانی؛
12 اس طریقہ کار میں، حیاتیاتی نمونوں سے جینومک ڈی این اے نکالا گیا، اور انفرادی حیاتیاتی نمونوں میں سلفونی لوریہ ریسیپٹر جین کے پولیمورفزم کا پتہ پولیمریز چین ری ایکشن ریسٹرکشن فریگمنٹ پولیمورفزم (PCR-RFLP) تجزیہ کے ذریعے سلفونی لوریہ ادویات کی افادیت کا اندازہ لگایا گیا۔
مصنوعی بروموفینول نیلا:
1. گلیشیل ایسٹک ایسڈ میں فینول ریڈ کو گھلائیں، ہلچل کے نیچے گلیشیل ایسٹک ایسڈ میں برومین کا محلول شامل کریں، چند منٹ تک ہلائیں، اسے 60 ڈگری گرم پانی میں ڈالیں، اسے کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا کریں، اور رات بھر رکھ دیں۔ فلٹر کریں، فلٹر کیک کو گلیشیل ایسٹک ایسڈ اور بینزین سے دھوئیں، اور بروموفینول بلیو حاصل کرنے کے لیے ہوا کو خشک کریں۔
2. گلیشیل ایسٹک ایسڈ میں فینول ریڈ کو تحلیل کریں، اسے ابلتے ہوئے نقطہ پر گرم کریں، گلیشیل ایسٹک ایسڈ میں تحلیل برومین کے محلول کو گرائیں، جب پیلا ٹھوس الگ ہوجائے تو فلٹر کریں، ایسیٹک ایسڈ سے فری برومین دھوئیں، اور خام مصنوعات حاصل کرنے کے لیے اسے ہوا میں خشک کریں۔ خالص بروموفینول نیلے رنگ کو حاصل کرنے کے لیے گلیشیل ایسٹک ایسڈ یا ایسیٹون اور گلیشیل ایسٹک ایسڈ مکس سالوینٹس کا استعمال کریں۔
3. محلول تیار کرنے کے لیے فینول ریڈ اور برومین کو ایسٹک ایسڈ میں حل کریں۔ سب سے پہلے، فینول ریڈ ایسٹک ایسڈ محلول کو ابلتے ہوئے نقطہ پر گرم کریں، پھر آہستہ آہستہ برومین ایسٹک ایسڈ محلول کو ہلچل کے تحت شامل کریں: جب فینول ریڈ ری ایکشن مکمل ہو جائے اور پیلے رنگ کے کرسٹل الگ نہ ہوں، ٹھنڈا اور فلٹر کریں۔ کرسٹل میں موجود مفت برومین کو تھوڑی مقدار میں ایسیٹک ایسڈ سے دھونے کے بعد، اسے ایسٹک ایسڈ یا ایسیٹون ایسٹک ایسڈ سے دوبارہ کرسٹلائز کریں، اور خالص بروموفینول بلیو حاصل کرنے کے لیے اسے ہوا میں خشک کریں۔