IPTG ریجنٹ CAS 367-93-1

آئی پی ٹی جی ری ایجنٹہم 2008 سے نامیاتی ترکیب کی ٹیکنالوجی پر توجہ مرکوز کر رہے ہیں، ہم اعلی-معیاری مصنوعات تیار کر سکتے ہیں، جو مکمل طور پر اپنی شاندار R&D ٹیم پر منحصر ہے۔ IPTG، CAS 367-93-1، کیمیکل ڈھانچہ isopropyl - پر مشتمل ہے یہ D-thiogalactoside اور فاسفیٹ گروپس پر مشتمل ہے۔ ان میں، - D-thiogalactoside galactose کا ایک analogue ہے، جس میں سلفر ایٹم آکسیجن ایٹم کی جگہ لے لیتا ہے۔ یہ خاص گلائکوسائیڈ ڈھانچہ IPTG کو DNA سے منسلک ہونے اور جین کے اظہار کو دلانے کی اجازت دیتا ہے۔ آئی پی ٹی جی کی پانی میں حل پذیری کم ہوتی ہے، لیکن یہ جسمانی نمکین اور فاسفیٹ بفر میں اچھی طرح گھل سکتی ہے۔ یہ 4.5 کی pKa ویلیو کے ساتھ تیزابی ہے، جو اس کی سالماتی ساخت میں فاسفیٹ گروپ سے متعلق ہے۔ خالص پانی میں کرسٹل بنانا آسان نہیں ہے، لیکن یہ اعلی ارتکاز کے محلول میں یا جب دوسرے مرکبات شامل کیے جاتے ہیں تو کرسٹل بنا سکتے ہیں۔ بیکٹیریل پروٹین کے اظہار کو دلانے کی صلاحیت کی وجہ سے، IPTG بعض مائکروجنزموں کے لیے حساس ہے۔

ہم عظیم کیمسٹری پر شرم کی بات نہیں کرتے! غیر معقول قیمت پر بھروسہ نہ کریں، براہ کرم اسی سطح کے معیار میں قیمت کا موازنہ کریں۔

حیاتیاتی ترکیب کا طریقہآئی پی ٹی جی ری ایجنٹعام طور پر galactose کو isopropyl گروپ- - D-thiogalactoside میں تبدیل کرنے کے لیے مائکروجنزموں یا انزائمز کے اتپریرک عمل کو استعمال کرتا ہے۔

Galactose خام مال کے طور پر

سب سے پہلے، galactose کو خام مال کے طور پر استعمال کرنا ضروری ہے۔ Galactose ایک پانچ کاربن شوگر ہے جو فطرت میں وسیع پیمانے پر موجود ہے اور اسے شربت یا کرسٹل کی شکل میں حاصل کیا جا سکتا ہے۔ بایو سنتھیسس میں، galactose کو انزیمیٹک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے isopropyl میں تبدیل کیا جاتا ہے- - D-thiogalactoside۔

مائکروبیل کلچر اور گیلیکٹوز میٹابولزم

اس کے بعد، مناسب مائکروجنزموں کو اتپریرک کے طور پر منتخب کرنا ضروری ہے، جس میں عام طور پر بیکٹیریا، خمیر اور سانچوں کو شامل کیا جاتا ہے۔ ان مائکروجنزموں کو کلچر میڈیم میں کاشت کریں تاکہ وہ مناسب حالات میں بڑھنے اور دوبارہ پیدا ہونے دیں۔ دریں اثنا، galactose، ایک غذائیت کے طور پر، مائکروجنزموں کے ذریعہ استعمال کیا جاتا ہے اور انزیمیٹک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے مطلوبہ انٹرمیڈیٹ میں میٹابولائز کیا جاتا ہے۔ اس مرحلے میں مخصوص ردعمل کا طریقہ کار اور کیمیائی مساوات مائکروجنزموں کی اقسام اور کاشت کے حالات کے لحاظ سے مختلف ہوتی ہیں۔

آئسومرائزیشن ری ایکشن آئسوپروپل گروپ تیار کرتا ہے- - D-Thiogalactoside-5' - فاسفیٹ ایسٹر

مائکروجنزموں کے ذریعہ تیار کردہ انزائمز کے عمل کے تحت، درمیانی مصنوعات isomerization کے رد عمل سے گزرتی ہیں، جس سے isopropyl گروپس- - D-thiogalactoside-5'- فاسفیٹ ایسٹر پیدا ہوتے ہیں۔ اس مرحلے کے رد عمل کا طریقہ کار یہ ہے کہ گیلیکٹوز کے ہائیڈروکسیل گروپ کو یوریڈین ٹرائی فاسفیٹ میں منتقل کیا جائے، جس سے آئسوپروپل گروپ- - D-thiogalactoside-5' - فاسفیٹ اور یوریڈین ڈائی فاسفیٹ پیدا ہوتا ہے۔ مخصوص کیمیائی مساوات مندرجہ ذیل ہے:

(CH₂اوہ)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂اوہ)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

ڈی پروٹیکشن گروپ آئیسوپروپائل گروپ- - ڈی-تھیوگلیکٹوسائڈ تیار کرتا ہے

آخری مرحلہ isopropyl گروپ سے حفاظتی گروپ کو ہٹانا ہے اس قدم میں عام طور پر رد عمل کو فروغ دینے کے لیے ایک اتپریرک کے طور پر تیزاب یا الکلی محلول کے استعمال کی ضرورت ہوتی ہے۔ مخصوص کیمیائی مساوات مندرجہ ذیل ہے:

(CH₂اوہ)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂اوہ)₂CHOH-OH + P (i)

علیحدگی اور تزکیہ

علیحدگی اور صاف کرنے کی تکنیکوں جیسے کہ نکالنے، جذب کرنے، کرومیٹوگرافی وغیرہ کا استعمال کرتے ہوئے، ٹارگٹ پروڈکٹ isopropyl کو صاف کیا جاتا ہے- - D-thiogalactoside کو رد عمل کے مرکب سے نکالا گیا تھا۔ اس قدم کا مقصد نجاست کو دور کرنا اور پریکٹیکل ایپلی کیشنز کی ضروریات کو پورا کرنے کے لیے پروڈکٹ کی پاکیزگی کو بہتر بنانا ہے۔

آئی پی ٹی جی ری ایجنٹIsopropyl- -D-thiogalactoside، انگریزی نام IPTG۔ پلیسبو انڈیسر کے طور پر، X-gal ایک کروموجینک سبسٹریٹ ہے، جو دونوں نیلے-سفید اسکریننگ کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔ IPTG کیمیکل بک ویکٹر کے لاکھ اوپیرون کے ڈی این اے سیگمنٹ کو -گیلیکٹوسیڈیس کے امینو-ٹرمینل فریگمنٹ کی ترکیب کرنے کے لیے آمادہ کر سکتا ہے، جو میزبان کے ذریعے انکوڈ شدہ عیب دار -گیلیکٹوسیڈیس کے ساتھ انٹراجینک تکمیل (کمپلیمنٹ) حاصل کر سکتا ہے۔

1. حیاتیاتی مواد کی تیاری:

IPTG کو بعض بایومیٹیریلز، جیسے کہ پولی سیکرائڈز، لیپوسومز وغیرہ کی تیاری کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ مخصوص خلیے کی جھلیوں یا پروٹینز سے منسلک ہو کر، IPTG خلیات یا بافتوں کے مخصوص جسمانی افعال کو فروغ دے سکتا ہے، بائیو میڈیکل انجینئرنگ کے شعبے کے لیے نئے تحقیقی اوزار اور علاج کی حکمت عملی فراہم کر سکتا ہے۔ مثال کے طور پر، آئی پی ٹی جی کو ایک محرک کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، یہ انجینئرنگ بیکٹیریا یا خمیر کے خلیات میں ہدف پروٹین کے اظہار اور سراو کو فروغ دے سکتا ہے، جسے مخصوص افعال کے ساتھ بائیو میٹریلز بنانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔

 

ان بائیو میٹریلز میں پولی سیکرائڈز، لیپوسومز، پروٹین کمپلیکس وغیرہ شامل ہو سکتے ہیں۔
بائیو میٹریلز کی تیاری کے عمل میں، آئی پی ٹی جی کا استعمال پیداواری عمل کو آسان بنا سکتا ہے، پیداواری کارکردگی کو بہتر بنا سکتا ہے اور پیداواری لاگت کو کم کر سکتا ہے۔ ایک ہی وقت میں، آئی پی ٹی جی کے اضافے کی مقدار اور دورانیے کو کنٹرول کرکے ہدف پروٹین کے اظہار کی سطحوں اور بائیو میٹریل خصوصیات کے عین مطابق ضابطے کو حاصل کیا جا سکتا ہے۔

2. منشیات کی جانچ:

 

IPTG بنیادی طور پر منشیات کی اسکریننگ میں ٹارگٹ جینز کے اظہار کو دلانے اور ٹارگٹ جینز کے ایکسپریشن پروڈکٹس کو اسکرین کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ خاص طور پر، IPTG lac|مصنوعات، لاکھ کی تعمیری تبدیلیوں کا باعث بنتی ہیں۔ lacO سے دور مصنوعات، اس طرح نقل کو چالو کرتے ہیں اور ہدف جین کے اعلی اظہار کو حاصل کرتے ہیں۔ نیلے رنگ کی سفید اسکریننگ کے عمل کے دوران، ریکومبیننٹ پلاسمڈ کے بغیر ٹرانسفارمینٹس کو آئی پی ٹی جی کے ذریعے کروموجینک سبسٹریٹ X-گیل کی موجودگی میں نیلی کالونیاں بنانے کی ترغیب دی جاتی ہے۔

جب غیر ملکی ٹکڑوں کو داخل کیا جاتا ہے تو، نتیجے میں پیپٹائڈ کے ٹکڑے ختم ہو جاتے ہیں تکمیلی صلاحیت: ریکومبیننٹ پلاسمڈ پر مشتمل تبدیل شدہ ریکومبیننٹ صرف کروموجینک انڈکشن میڈیم پر سفید Escherichia coli بنا سکتے ہیں۔ رنگ کی تبدیلیوں پر مبنی منشیات کی جانچ کا یہ طریقہ مخصوص بیماریوں سے متعلق پروٹین کا مطالعہ کرنے اور منشیات کے نئے اہداف کی تلاش میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔

3. جینیاتی تحقیق:

 

IPTG اکثر جینیاتی تحقیق میں ایک سالماتی آلے کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ ایک مخصوص جین کی ترتیب سے منسلک ہونے سے، IPTG اس جین کے اظہار کی سطح کو منظم کر سکتا ہے، اس طرح مخصوص فینوٹائپس یا بیماریوں کے ساتھ اس کے تعلقات کا مطالعہ کرتا ہے۔
جینیاتی تحقیق میں، IPTG بنیادی طور پر ایک inducer کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے اور lactase پر lactose کے انڈکشن اثر کی تقلید کر سکتا ہے۔ یہ عام طور پر خارجی جینوں کے اظہار کو دلانے کے لیے استعمال ہوتا ہے، خاص طور پر سالماتی حیاتیات اور جینیاتی انجینئرنگ کی تحقیق میں۔
آئی پی ٹی جی استعمال کرتے وقت، یہ ایسچریچیا کولی جیسے ایکسپریشن میزبانوں میں جینز کو نشانہ بناتا ہے۔ ٹارگٹ جین کو مناسب پروموٹرز اور ریگولیٹری عناصر کے ساتھ ایکسپریشن ویکٹر میں بنا کر، یہ Escherichia coli خلیوں میں پروٹین پیدا کر سکتا ہے۔ یہ حوصلہ افزائی اثر جین کے فنکشن، پروٹین کے تعاملات، اور نئی ادویات اور بائیو میٹریلز تیار کرنے کے لیے بہت اہمیت کا حامل ہے۔

اس کے علاوہ، آئی پی ٹی جی کو پروٹین کرسٹاللائزیشن کو فروغ دینے کے لیے پروٹین کرسٹاللائزیشن کے تجربات میں ایک محرک کے طور پر بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ اس کے عمل کا طریقہ کار پروٹین میں ہائیڈروفوبک خطوں سے منسلک ہو کر پروٹین کی تشکیل کو تبدیل کرنا ہے، اس طرح پروٹین کے مالیکیولز کے درمیان جمع اور کرسٹلائزیشن کو فروغ دینا ہے۔

یہ جمع اور کرسٹلائزیشن کا عمل الٹنے والا ہے، اس لیے آئی پی ٹی جی کو شامل کرکے پروٹین کرسٹلائزیشن کی حوصلہ افزائی کی جا سکتی ہے، یا آئی پی ٹی جی کو ہٹا کر پروٹین کرسٹل کو تحلیل کیا جا سکتا ہے۔

4. زرعی درخواست:

 

زرعی ایپلی کیشنز میں،آئی پی ٹی جی ری ایجنٹبائیو پیسٹیسائیڈ کی ایک نئی قسم کے طور پر، جڑی بوٹیوں کے مخصوص اثرات ہیں۔ یہ پودوں میں galactose کے عام میٹابولزم میں مداخلت کر سکتا ہے، اس طرح ان کی عام نشوونما کو متاثر کرتا ہے۔ مداخلت کا یہ طریقہ کچھ جڑی بوٹیوں کے لیے زیادہ حساس ہے، اس لیے IPTG کا استعمال فصلوں کو نقصان پہنچائے بغیر جڑی بوٹیوں کو مؤثر طریقے سے ہٹا سکتا ہے۔ اس دوران، IPTG ایک نئی قسم کی بایو پیسٹیسائڈ ہے، یہ روایتی کیمیائی کیڑے مار ادویات کے مقابلے میں انسانوں اور جانوروں کے لیے بہتر ماحول دوستی اور اعلیٰ حفاظت کا حامل ہے۔ لہذا، IPTG کے پاس زرعی ایپلی کیشنز میں درخواست کے وسیع امکانات ہیں۔

جین کے اظہار کے ضابطے کے ساتھ ممکنہ مداخلت

 

غیر مخصوص انڈکشن

آئی پی ٹی جی، بطور محرک، اس کے عمل میں ایک خاص خصوصیت ہے، لیکن بعض صورتوں میں غیر-مخصوص انڈکشن ہو سکتا ہے۔ IPTG نہ صرف ٹارگٹ جینز کے اظہار کی حوصلہ افزائی کرتا ہے بلکہ خلیات کے اندر موجود دیگر جینز کے اظہار کو بھی متاثر کر سکتا ہے۔ یہ اس حقیقت کی وجہ سے ہو سکتا ہے کہ آئی پی ٹی جی کے ریپریسر پروٹین سے منسلک ہونے کے بعد، یہ ریپریسر پروٹین کی تشکیل اور کام کو تبدیل کر دیتا ہے، جس کی وجہ سے اس کے دوسرے اوپیرونز پر کچھ خاص اثرات مرتب ہوتے ہیں، اس طرح غیر ہدف والے جین کے اظہار کی روک تھام سے نجات ملتی ہے۔

غیر مخصوص انڈکشن انٹرا سیلولر پروٹین ایکسپریشن پروفائلز میں تبدیلیوں کا باعث بن سکتا ہے، غیر متوقع پروٹین تیار کرتا ہے جو تجرباتی نتائج کے تجزیہ اور فیصلے میں نہ صرف مداخلت کرتا ہے بلکہ خلیات کے عام جسمانی افعال پر بھی منفی اثرات مرتب کر سکتا ہے۔ مثال کے طور پر، کچھ پروٹین ایکسپریشن تجربات میں، آئی پی ٹی جی کے ساتھ شامل کرنے کے بعد، ہدف پروٹین کے اظہار میں اضافے کا پتہ لگانے کے علاوہ، کچھ دوسرے نامعلوم پروٹینوں کے اظہار کی اپ گریجشن بھی پائی گئی۔ یہ غیر-مخصوص ظاہر شدہ پروٹین ہدف پروٹین کی تطہیر اور فنکشنل اسٹڈیز میں مداخلت کر سکتے ہیں۔

حوصلہ افزائی اظہار کی ناقابل واپسی

عام حالات میں، inducer کو ہٹانے کے بعد، جین کے اظہار کو انڈکشن سے پہلے کی سطح پر واپس آنا چاہیے۔ تاہم، مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ IPTG حوصلہ افزائی جین اظہار میں ایک خاص حد تک ناقابل واپسی ہوسکتی ہے. ایک بار جب IPTG کو جین کے اظہار کو دلانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، یہاں تک کہ اگر IPTG کو ہٹا دیا جاتا ہے، تب بھی جین کے اظہار کی سطح اعلیٰ سطح پر رہ سکتی ہے اور شامل کرنے سے پہلے اسے بنیادی سطح پر بحال نہیں کیا جا سکتا۔

یہ ناقابل واپسی IPTG کی وجہ سے طویل مدتی انٹرا سیلولر تبدیلیوں کی وجہ سے ہو سکتی ہے، جیسے کرومیٹن کے ڈھانچے میں تبدیلیاں اور ٹرانسکرپشن عوامل کی تبدیلیاں، جو کہ اعلی درجے کی جین کی نقل کی سرگرمی کو برقرار رکھتی ہیں۔ حوصلہ افزائی اظہار کی ناقابل واپسی تجربات میں بڑی مشکلات کا باعث بن سکتی ہے، خاص طور پر ایسے تجربات میں جن میں جین کے اظہار کی سطحوں کے عین مطابق ضابطے کی ضرورت ہوتی ہے، جو غلط اور غیر تولیدی تجرباتی نتائج کا باعث بن سکتے ہیں۔

اس کے مستحکم مالیکیولر ڈھانچے اور قابل اعتماد دلانے والی سرگرمی کی بنیاد پر، IPTG دنیا بھر میں مالیکیولر بائیولوجی لیبارٹریوں میں ایک ناگزیر ریجنٹ بن گیا ہے۔ یہ بڑے پیمانے پر ریکومبیننٹ پروٹین ایکسپریشن، جین فنکشن ریسرچ، اور مائکروبیل انجینئرنگ کے تجربات میں استعمال ہوتا ہے، جو سائنسی تحقیق اور صنعتی پیداوار کے لیے مستحکم انڈکشن اثرات فراہم کرتا ہے۔ نامیاتی ترکیب کی ٹیکنالوجی اور سخت کوالٹی کنٹرول پر ہماری طویل مدتی توجہ اس بات کو یقینی بناتی ہے کہ ہماری IPTG مصنوعات اعلیٰ پاکیزگی، استحکام اور مستقل مزاجی کو برقرار رکھتی ہیں، مؤثر طریقے سے سائنسی تجربات اور صنعتی ایپلی کیشنز کی متقاضی ضروریات کو پورا کرتی ہیں۔

ایک پیشہ ور R&D ٹیم کے تعاون سے، ہم عالمی محققین اور مینوفیکچررز کی بہتر خدمت کے لیے ترکیب کے عمل کو بہتر بنانے اور مصنوعات کی کارکردگی کو بہتر بناتے رہتے ہیں۔ اس کے واضح طریقہ کار، مستحکم خصوصیات، اور وسیع اطلاق کے ساتھ، IPTG لائف سائنس ریسرچ میں ایک بنیادی ریجنٹ رہے گا، اور ہم بایو ٹیکنالوجی کی ترقی کے لیے اعلی-معیار کی مصنوعات اور پیشہ ورانہ تکنیکی مدد فراہم کرتے رہیں گے۔

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: iptg reagent cas 367-93-1، سپلائرز، مینوفیکچررز، فیکٹری، تھوک، خرید، قیمت، بلک، برائے فروخت